ISO 16654: Nachweis von Escherichia coli O157 und Lebensmittelsicherheit
Ein horizontales Verfahren zum Nachweis von Escherichia coli O157
Was ist Escherichia coli O157?
Escherichia coli O157 ist ein E. coli-Stamm, der Shiga-Toxin produziert. Dieser Bakterienstamm kommt insbesondere in folgenden Lebensmitteln vor:
- Rohes Fleisch und Fleischprodukte,
- Unpasteurisierte Milch und Milchprodukte,
- Rohes Gemüse und Obst (insbesondere solche, die mit kontaminiertem Wasser bewässert wurden).
E. coli O157 kann beim Menschen schwerwiegende Gesundheitsprobleme verursachen und insbesondere bei älteren Menschen, Kindern und Personen mit geschwächtem Immunsystem lebensbedrohliche Erkrankungen wie das hämolytisch-urämische Syndrom (HUS) auslösen.
Nachweis von Escherichia coli O157 in Lebens- und Futtermitteln
Die Untersuchung auf Escherichia coli O157 in Lebensmitteln oder Tierfutter erfolgt im Rahmen der Norm „ISO 16654“ mittels horizontaler Methode. Definition von Escherichia coli O157 gemäß der Norm ISO 16654: Es handelt sich um Mikroorganismen, die auf der Oberfläche des in der Norm verwendeten Plattierungsmediums typische Kolonien bilden, Indol produzieren und insbesondere mit Antiserum gegen das O157-Antigen agglutinieren.
ISO 16654 Analyseprinzip
Der Nachweis von Escherichia coli O157 im Rahmen der ISO 16654 erfolgt in vier Schritten:
- Anreicherung der homogenisierten Testprobe in modifiziertem Tryptone-Soja-Bouillon mit Novobiocin (mTSB + N) durch Inkubation bei 41,5 °C ± 1 °C für 6 Stunden, gefolgt von einer Inkubation von 12 bis 18 Stunden.
- Abtrennung und Konzentration der Mikroorganismen mittels immunomagnetischer Partikel, die mit Antikörpern gegen E. coli O157 beschichtet sind.
- Isolierung durch Subkultivierung der immunomagnetischen Partikel mit Bakterien, die auf CT-SMAC (Cefixim-Tellurit-Sorbitol-MacConkey-Agar) haften, und Auswahl eines zweiten selektiven Isolationsagars durch den Anwender.
- Verifizierung von Sorbitol-negativen Kolonien aus CT-SMAC und typischen E. coli O157-Kolonien auf dem zweiten Isolationsagar durch Indolbildung und Agglutination mit E. coli O157-Antiserum.
Normative Standards
- ISO 6887-1, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln – Vorbereitung von Proben für mikrobiologische Untersuchungen, Erstsuspension und Dezimalverdünnungen – Teil 1: Allgemeine Regeln für die Vorbereitung der Erstsuspension und der Dezimalverdünnungen.
- ISO 7218, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln – Allgemeine Regeln für mikrobiologische Untersuchungen.
Die Nanolab-Laborgruppe bietet weiterhin Dienstleistungen im Rahmen der Untersuchung auf Escherichia coli O157 an. Gleichzeitig bieten wir auch Dienstleistungen zum Thema Ammoniakbestimmung in Geflügelfleischprodukten an.
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